近幾年光遺傳學在電生理領(lǐng)域非?;馃?,在不了解它之前相信很多人會覺得很**,很難懂。在我們了解之后會發(fā)現(xiàn)其實它很簡單,只是一種工具的應用:
通過基因工程,科學家構(gòu)建出了攜帶有特定種類視蛋白基因的病毒載體,用它們感染培育好的實驗動物,再通過各種操作將視蛋白特異性表達在某一類神經(jīng)細胞上。這樣一來,一類新的轉(zhuǎn)基因?qū)嶒瀯游镎Q生了,它們腦內(nèi)將有且僅有這一類神經(jīng)細胞對光敏感。
視蛋白是一種對光敏感的獨特蛋白,也就是附著于細胞膜上的光敏感離子通道,在受光刺激后打開并向細胞內(nèi)運送特定的某種離子,這樣一來就可以通過光刺激的手段實現(xiàn)對細胞的電活動加以控制。
*簡單的例子,人的眼睛的視網(wǎng)膜上就長滿了視紫紅質(zhì)(一種視蛋白)的視錐細胞和視桿細胞,它們接收到大自然界的光刺激后,將光線轉(zhuǎn)化為電信號送到大腦,我們才看到了五彩繽紛的顏色。

東樂自然基因所代理的美國ALA公司光刺激器正是這樣一款給予光刺激的系統(tǒng):

從光遺傳學發(fā)展以來,給光刺激的儀器就開始陸續(xù)發(fā)展。*早美國斯坦福大學所做的光遺傳學實驗就是通過SUTTER公司的DG-4光源來給光刺激,直接通過顯微鏡的物鏡給光刺激。
到今天,這種方法仍然是給光刺激的手段之一,它的優(yōu)點是通過光柵光源+物鏡可以給出想要的任何波段的光,且光斑大小可以通過聚焦的方式調(diào)節(jié)。而目前通過物鏡給光也可以直接先確定好需要哪種波段的光,購置一套Cool LED的光源加載在顯微鏡上,這樣的方式在性價比就顯得非常高了。
上述的這種采用冷光源結(jié)合顯微鏡物鏡給光的方式已經(jīng)見于很多實驗室。作為光刺激,確實是比較好的方式方法。圖中的這種Cool LED光源是英國Scientifica公司的產(chǎn)品。目前也有其他公司的類似產(chǎn)品,也有國產(chǎn)的類似產(chǎn)品。其原理簡單,價格相對也不貴。
下面詳細介紹一下東樂自然基因公司所代理的ALA公司的光刺激器。下圖為光刺激的主機部分:光源。

在LIGHT OUTPUT 下面是一個 light guide ,這是一個光纖接口,通過它來連接光纖。
光源內(nèi)部可以裝置三種顏色的燈泡,465nm Blue LED 520nm Green LED 624nm Amber LED。
需要注意的是:此光源內(nèi)只能安裝一種顏色的燈泡,比如已經(jīng)安裝了 藍光的燈泡,如果需要使用其他兩種顏色的光的時候,需要拆卸這個光源的盒子,更換其他顏色的燈泡。而這個工作是非常簡單的。

光纖的另外一端連接到Axon 探頭上安裝的這個很特別的holder上。
下面來介紹下這個特殊的holder:

我們在膜片鉗實驗中用到的holder,也就是Axon公司的holder,型號: 1-HL-U 。它是一個直的,沒有分支的holder,相信大家都應該見過。而這種特殊的holder是專門為了光刺激實驗所涉及。多出一個支路,是專門提供給光纖使用的。
該holder前面細長的光纖是holder本身自帶的。在使用時只需將holder安裝在探頭上,然后將黑色的光纖插入到holder的分支處即可。
此部分可以看到藍色光纖的前面有一小段銀色部分。這個就是銀絲(記錄電極)。
這個特點目前其他廠家的光刺激器(含國產(chǎn))都沒有!而核心之處也就是這個特別的holder!光刺激器與電生理實驗,特別是腦片膜片鉗實驗息息相關(guān)。東樂自然基因生命科學公司在電生理領(lǐng)域經(jīng)營多年,在國內(nèi)擁有廣泛的用戶群體!歡迎廣大實驗室工作人員及經(jīng)銷商來電咨詢!電話:010-62257793.

東樂自然基因華中區(qū)銷售部 吳正文供稿